一、梅毒螺旋體檢查
　　（一） 檢查方法
　　1．暗視野顯微鏡檢查：在皮損處，用玻片刮取組織滲出液或淋巴結穿刺液，見有活動的梅毒螺旋體。
　　2．免疫熒光染色：在熒光顯微鏡下可見綠色的梅毒螺旋體。
　　3．活體組織檢查梅毒螺旋體，如用銀染色法（Warthin-starry）法或（Levoaditis法)或熒光抗體染色，可查見梅毒螺旋體，呈黑褐色，有螺旋結構，位于真皮毛細血管周圍。銀染色的陽性結果需謹慎解釋，因為類似梅毒螺旋體的其他物質易混淆。而特異性熒光檢查則更為可靠。

　　（二） 螺旋體的鑒別
　　鏡下檢查梅毒螺旋體與雅司、地方性梅毒、品他三種非性病性螺旋體鑒別，此外還應與齒大螺旋體、齒小螺旋體、軟螺旋體、生殖器螺旋體相鑒別。
　　1．雅司、地方性梅毒、品他三種非性病螺旋體：形態上不能與梅毒螺旋體相區別，但流行病學、病史、臨床表現可以鑒別；
　　2．齒大螺旋體：為疏螺旋體，比梅毒螺旋體長，存在于口腔中，尤其在齒縫內最多；
　　3．齒小螺旋體：比梅毒螺旋體短，旋距也短，運動不規則，兩端較中部略寬。主要見于齒垢中；
　　4．軟螺旋體：為疏螺旋體，螺旋較少，運動不規律且快，常不斷改變其形態。寄生于皮膚潰瘍中。
　　5．生殖器螺旋體：比梅毒螺旋體短小，螺旋體大而不規則，生于陰垢內，不經常清洗者檢出率較高。
　　6．其他：與螺旋形網狀纖維、纖維蛋白細絲、纖毛、串狀紅細胞等呈螺旋狀的物體相鑒別。

　　二、梅毒血清試驗
　　根據所用抗原不同，梅毒血清試驗分為以下兩大類：
　　（一） 非梅毒螺旋體抗原血清試驗，用心磷脂作抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，亦稱反應素。本試驗敏感性高而特異性較低，且易發生生物學假陽性。早期梅毒患者經充分治療后，反應素可以消失，早期未經治療者到晚期，部分病人中反應素也可以減少或消失。目前一般作為篩選和定量試驗，觀察療效，復發及再感染。
　　1．性病研究實驗室試驗（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）；用心磷脂、卵磷脂及膽固醇為抗原，可作定量及定性試驗，試劑及對照血清已標準化，費用低。此法常用，操作簡單，需用顯微鏡讀取結果，缺點是一期梅毒敏感性不高。
　　2．快速血漿反應素試驗（Rapid Plasma reagin test， RPR）：是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似，優點是肉眼即可讀出結果。
　　3．不加熱血清反應素玻片試驗（Unheated Serum Reagin USR）也是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似。
　　（二） 梅毒螺旋體抗原血清試驗：用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體。這種試驗敏感性和特異性均高，一般用作證實試驗。這種試驗是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者經過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應仍持續存在陽性，因此，不能用于觀察療效。
　　1．熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗（FTA-ABS Test）：此法是較敏感和較特異的螺旋體試驗。
　　2．梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）：敏感性和特異性均高，操作簡便，但對一期梅毒不如FTA-ABS試驗敏感。
　　3．梅毒螺旋體制動試驗（Treponema Pallidum immobilization ，TPI）；用Nichol株螺旋體（活的）加病人血清（含抗體）后，在補體的參與下可抑制螺旋體的活動。如≥50%梅毒螺旋體停止活動，則為陽性。此試驗特異性、敏感性均高，但設備要求高，操作難，僅供研究用。

　　三、基因診斷技術檢測梅毒螺旋體
　　梅毒螺旋體不能進行體外培養。檢測臨床標本中梅毒螺旋體最敏感、可靠的方法是兔感染試驗（RIT），RIT能證實活的梅毒螺旋體存在，是檢測梅毒螺旋體常用的標準方法。然而用RIT對新生兒或成人梅毒進行常規診斷不切合實際。梅毒的血清學診斷對確定感染及治療很有意義，但對早期梅毒診斷不敏感，對先天性及神經性梅毒的診斷不夠特異。血清學試驗用作先天性梅毒的輔助診斷，其首要問題是將無癥狀感染嬰兒從非感染嬰兒區別開來，這些嬰兒的母親梅毒血清試驗陽性，困難在于不能將母親體液免疫反應同嬰兒的抗體反應相區別，因為母親的IgG可傳遞給胎兒。另外由于IgG終身存在，所以很難評價治療結果。血清學診斷常常又存在著假陽性。